ELISA試劑盒的溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃等。37℃是試驗室中常用的保溫溫度，也是大多數抗原抗體結合的適宜溫度。在樹(shù)立ELISA方法作反響動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，試驗標明，兩次抗原抗體反響一般在37℃經(jīng)1～2小時(shí)，產(chǎn)品的生成可達高峰。為加快反響，可進(jìn)步反響的溫度，有些試驗在43℃進(jìn)行，但不宜選用更高的溫度。但因所需時(shí)刻太長(cháng)，在ELISA試劑盒中一般不予選用。

ELISA試劑盒實(shí)踐進(jìn)程操作技巧：

1）加樣器應筆直參加標本，防止刮擦包被板底部，加樣進(jìn)程中防止液體外濺，血清殘留在反響孔壁上。

 2）加樣器吸頭要清洗干凈，防止污染，加樣次第要與說(shuō)明書(shū)共同，否則可導致成果過(guò)錯，試驗重復性差。

 3）在進(jìn)行試驗前應對試驗的物理參數有充沛的了解，如環(huán)境溫度、反響孵育溫度和孵育時(shí)刻、洗刷的次數等，要先檢查水育箱溫度，ELISA試劑盒是否符合要求。

 4）顯色液量不行過(guò)多，加樣的工作環(huán)境不能處于陽(yáng)光直射的環(huán)境下，加顯色體系后要避光反響，顯色液量不能過(guò)多，防止顯色過(guò)強。

 5）要確保加液量共同，在使用時(shí)感覺(jué)滴瓶加液不如加樣器好，滴瓶不易控制加液量禁絕，造成顯色不一致，判別過(guò)錯。