大家在養細胞的時(shí)候，想必大家也一定遇到過(guò)細胞狀態(tài)差這種情況，但是細胞狀態(tài)差，有很多種原因造成。細胞狀態(tài)很差，常常出現的現象是：細胞邊緣不清晰、細胞不飽滿(mǎn)、折光性差、背景比較臟、黑點(diǎn)很多、細胞碎片多（細胞凋亡后的細胞碎片）、單個(gè)細胞內有空泡（凋亡）且空泡比較多；如果細胞出現老化，也就是細胞比較扁平、增殖減緩、細胞核體積增大、細胞突觸變多，此時(shí)觀(guān)察到的細胞狀態(tài)也是不正常的。所以，除了考慮血清和細菌污染的問(wèn)題，細胞老化也不容忽視~

細胞老化的征兆：

一、細胞周期阻滯

長(cháng)期的細胞周期阻滯是老化細胞的基本特征，也是體外鑒定細胞老化的指標。為了檢查細胞是否躍出了細胞周期，人們通常檢測增殖指示分子Ki-67的表達豐度；或者通過(guò)將與胸腺嘧啶相似的溴脫氧尿mi啶（Bromodeoxyuridine，BrdU）摻入到細胞培養基中，觀(guān)察是否有新的DNA合成。細胞老化主要表現為G1期阻滯，個(gè)別情況下也可伴隨G2/M期周期阻滯，或直接由G2/M期阻滯誘發(fā)形成。

二、細胞形態(tài)改變

雖然由于細胞周期的中斷和DNA復制的停止，老化細胞內的DNA含量與正常細胞類(lèi)似，但 RNA與蛋白質(zhì)豐度均比正常細胞要明顯升高。這是因為，盡管細胞進(jìn)入老化階段后蛋白質(zhì)的整體合成速率降低，但是蛋白質(zhì)的降解體系受到更加明顯的抑制，導致蛋白質(zhì)在細胞內持續堆積。但，由于不同組織來(lái)源的細胞，其形態(tài)本就各不相同，因此，目前還并無(wú)客觀(guān)的、統一的標準從細胞形態(tài)判斷并定義老化細胞。換句話(huà)說(shuō)，目前并不能直接根據細胞的形態(tài)去判斷是否老化細胞。

總結：

研究表明,衰老細胞的細胞核、細胞質(zhì)和細胞膜等均有明顯的變化：

①細胞內水分減少,體積變小,新陳代謝速度減慢；

②細胞內酶的活性降低；

③細胞內的色素會(huì )積累；

④細胞內呼吸速度減慢,細胞核體積增大,核膜內折,染色質(zhì)收縮,顏色加深.線(xiàn)粒體數量減少,體積增大；

⑤細胞膜通透性功能改變,使物質(zhì)運輸功能降低.

如何防止細胞老化：

1. 不要等細胞長(cháng)得太滿(mǎn)才傳代。細胞太密會(huì )導致細胞狀態(tài)下降，產(chǎn)生細胞接觸性抑制。

2. 細胞不要消化過(guò)度。采用醫蛋白酶消化細胞，會(huì )造成細胞表面一定程度的細胞損傷。

3. 最重要的是使用優(yōu)質(zhì)的血清和培養基：干細胞對培養基中的內毒素非常敏感。除了要留意基礎培養基的內毒素外，也要留意血清的內毒素。如果血清中內毒素≥3EU/ml時(shí)，干細胞很容易老化或死亡，導致細胞“亞健康"狀態(tài)，導致實(shí)驗受到影響。很多使用者，在血清在試用前，就會(huì )通過(guò)提早審核該批次《檢測報告》，以決定是否入圍進(jìn)行試用。

4. 在開(kāi)始養細胞并傳代時(shí)，也要特別注意凍存細胞，以保持細胞有種子庫存在，可以有效避免細胞損傷。