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關(guān)于細胞培育這幾點(diǎn)必定要注意了
更新時(shí)間:2021-05-28   點(diǎn)擊次數:1622次

細胞培育技能又叫細胞克隆技能。細胞培育技能指的是細胞在體外條件下的成長(cháng),在培育的進(jìn)程中細胞不再構成安排(動(dòng)物),今天的文章中跟我們介紹一些關(guān)于細胞培育的基礎知識!

一、細胞培育的基本概念
 體外培育(in vitro culture)包括所有結構層次的培育,即:安排培育(tissue culture)、細胞培育(cell culture)和器官培育(organ culture)。
細胞培育(Cell culture)指從生物機體取出部分安排渙散成單個(gè)細胞或直接從機體取出單個(gè)細胞,也可把體外培育細胞渙散成單個(gè)細胞在體外條件下培育,細胞能繼續存活與增殖。
 
二、細胞培育意圖與用處
1、科學(xué)研討
(1)藥物研討開(kāi)發(fā),如新藥挑選,疫苗、基因工程藥物、細胞工程藥物研討與開(kāi)發(fā)、單克隆抗體制備等。
(2)基礎研討,如藥物效果機理、基因功能、疾病產(chǎn)生機理等研討。
2、生物制藥
(1)疫苗出產(chǎn):如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等),多肽疫苗(腫瘤疫苗)等。
(2)基因工程藥物出產(chǎn):如EPO等。
(3)抗體藥物、基因治療藥物出產(chǎn)。
(4)細胞工程藥物出產(chǎn):生物細胞內的一些生物活性多肽,生物活性物質(zhì)等。
(5)使用細胞法體外測定生物活性物質(zhì)的活性;并預測其在體內的藥效和代替體內法檢測其成品的生物活性。
 
三 、原代培育和傳代培育
原代培育(primary culture):將動(dòng)物機體的各種安排從機體中取出,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械辦法處理,渙散成單細胞,置適宜的培育基中培育,使細胞得以生計、成長(cháng)和繁衍,這一進(jìn)程稱(chēng)原代培育。
 但實(shí)際上,通常把第依代至第十代以?xún)鹊呐嘤毎y稱(chēng)為原代細胞培育。
傳代培育(subculture):細胞在培育器皿中成長(cháng)必定時(shí)刻后,被分開(kāi)接種到新的培育器皿中。
     當原代培育成功今后,跟著(zhù)培育時(shí)刻的延長(cháng)和細胞不斷割裂,一則細胞之間互相觸摸而產(chǎn)生觸摸性按捺,成長(cháng)速度減慢甚至中止;另一方面也會(huì )因營(yíng)養物不足和代謝物堆集而不利于成長(cháng)或產(chǎn)生中毒。此時(shí)就需要將培育物分割成小的部分,重新接種到別的的培育器皿(瓶)內,再進(jìn)行培育。
 對單層培育而言,80%集合或剛集合的細胞是較理想的傳代階段。
 
四、體外培育細胞的方法
 集體培育(mass culture),將含有必定數量細胞的懸液置于培育瓶中,讓細胞貼壁成長(cháng),集合(confluence)后構成均勻的單細胞層;
克隆培育(clonal culture),將高度稀釋的游離細胞懸液加入培育瓶中,各個(gè)細胞貼壁后,互相間隔較遠,經(jīng)過(guò)成長(cháng)增殖每一個(gè)細胞構成一個(gè)細胞集落,稱(chēng)為克?。╟lone)。一個(gè)細胞克隆中的所有細胞均來(lái)源于同一個(gè)祖先細胞。

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