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ELISA試劑盒實(shí)驗樣本收集準備小結
更新時(shí)間:2019-06-05   點(diǎn)擊次數:1392次

ELISA試劑盒樣本實(shí)驗準備:

在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天就進(jìn)行檢測的樣本,及時(shí)儲存在4℃備用。對于隔天再檢測的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃備用,有條件的,-70℃凍存備用。標本應避免反復凍融。

 

液體類(lèi)標本:  包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

 

1.  血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。

 

2.  血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。

 

3.  尿液:用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

 

4.  細胞培養上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。

 

5.  培養細胞:檢測細胞內的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。

 

6.  組織標本:切割標本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

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